臨床微生物標(biāo)本采集作業(yè)指導(dǎo)書(shū)

　　1.目的

　　采集標(biāo)本以做臨床微生物檢驗(yàn)。

　　2.適用范圍

　　適用于本科做臨床微生物項(xiàng)目所需標(biāo)本的采集。

　　3. 物品準(zhǔn)備：無(wú)菌試管、血培養(yǎng)瓶等。

　　4. 檢驗(yàn)申請(qǐng)單填寫(xiě)要求：

　　4.1 檢驗(yàn)申請(qǐng)單用鋼筆填寫(xiě)，使用正楷字，字跡清楚，填寫(xiě)完整。

　　4.2 填寫(xiě)內(nèi)容包括：受檢者姓名、性別、年齡、化驗(yàn)單編號(hào)、臨床診斷、送檢標(biāo)本、檢驗(yàn)項(xiàng)目、標(biāo)本采集標(biāo)本年月日時(shí)、申請(qǐng)醫(yī)生及采樣者簽名。

　　5.各類微生物培養(yǎng)標(biāo)本的采集

　　5.1 血(骨髓)培養(yǎng)標(biāo)本的采集：

　　嚴(yán)格以無(wú)菌操作抽取血液(骨髓)，于酒精燈火焰旁，精確而迅速地將標(biāo)本注入血培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，并輕輕搖勻，以防凝固，血液量應(yīng)相當(dāng)于培液的十分之一，一般以 5mL 為宜，骨髓量一般為 1～2mL。為提高檢出率，應(yīng)在病人用藥前或發(fā)熱高峰時(shí)采取標(biāo)本。

　　5.2 尿液培養(yǎng)標(biāo)本采集：

　　一般采集中段尿，囑患者用肥皂水及溫開(kāi)水洗外陰部及尿道口，用無(wú)菌紗布拭干，令其排尿，開(kāi)始排出之尿棄去，而后采集中段尿于無(wú)菌培養(yǎng)管內(nèi)送檢。雙側(cè)腎盂尿，由專科醫(yī)師采集，標(biāo)記清楚左、右，以免混淆誤診。

　　5.3 糞便培養(yǎng)標(biāo)本采集：

　　一般細(xì)菌培養(yǎng)，挑取糞便粘液、膿血部分，液態(tài)便應(yīng)挑取絮狀物。無(wú)法獲取糞便時(shí)，可采取直腸拭子，將棉棒用生理鹽水或甘油緩沖鹽水濕潤(rùn)，之后插入肛門(mén)內(nèi) 4~5cm，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)一圈取出。標(biāo)本留取后，應(yīng)及時(shí)送檢;防止尿液混入，以防降低檢出陽(yáng)性率。特殊培養(yǎng)應(yīng)與實(shí)驗(yàn)室聯(lián)系，按有關(guān)規(guī)定留取標(biāo)本。

　　5.4 痰液及支氣管分泌物標(biāo)本的采集：

　　5.4.1 采集痰液標(biāo)本以清晨為好，囑患者先用溫開(kāi)水漱口數(shù)次，以除去口腔內(nèi)大部分雜菌，然后用力咳出氣管深部的痰液一口，吐入無(wú)菌培養(yǎng)皿內(nèi)，立即送檢。

　　5.4.2 支氣管分泌物，應(yīng)由醫(yī)師利用支氣管鏡直接自患者支氣管內(nèi)采取后立即送檢。

　　5.5膿液及創(chuàng)面分泌物標(biāo)本的采集

　　5.5.1 采取標(biāo)本時(shí)，應(yīng)盡量揩去病灶表面的污染菌，以免影響檢驗(yàn)結(jié)果。用無(wú)菌棉拭采取膿液及病灶分泌物于無(wú)菌培養(yǎng)管內(nèi)送檢，亦可用無(wú)菌手術(shù)采取組織碎片送檢。

　　5.5.2 膿樣標(biāo)本，最好用無(wú)菌注射器，抽取膿液，如行切開(kāi)排膿亦可以用無(wú)菌棉拭采取標(biāo)本送檢。

　　5.6咽喉、鼻、耳、眼分泌物標(biāo)本的采集

　　以無(wú)菌棉拭采取患者喉部或鼻、耳、眼部分分泌物，立即送檢。采集標(biāo)本時(shí)應(yīng)盡量勿使棉拭接觸唾液及口腔其他部位的粘膜，以防唾液的抑菌作用和雜菌污染。

　　5.7生殖器官標(biāo)本的采集

　　以無(wú)菌棉拭采取病灶分泌物于培養(yǎng)管內(nèi)，立即送檢。做有關(guān)性病病原體 PCR 檢測(cè)時(shí)，取特定容器，按要求留取標(biāo)本。

　　6. 其它：如分析失敗，分析原因并告知受檢者重新采樣檢驗(yàn)。

　　7.相關(guān)文件

　　8.1采樣管理程序

　　8.2標(biāo)本管理程序

　　8.相關(guān)記錄

篇2:臨床微生物標(biāo)本采集與送檢規(guī)范

臨床微生物標(biāo)本采集與送檢是目前臨床實(shí)驗(yàn)室診斷質(zhì)量保證中較為薄弱的環(huán)節(jié),嚴(yán)重影響臨床微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室對(duì)感染樣本中致病菌的分離培養(yǎng)的陽(yáng)性率和醫(yī)院感染病原體監(jiān)控,也影響臨床診斷,合理選用抗菌藥物,降低耐藥菌的產(chǎn)生和提高感染的治愈率,而且對(duì)預(yù)測(cè)或及時(shí)發(fā)現(xiàn)醫(yī)院感染的暴發(fā)流行、杜絕感染蔓延、研究醫(yī)院感染的發(fā)病機(jī)制和環(huán)節(jié)、制定有效的醫(yī)院感染控制措施等,均具有十分重要的意義。嚴(yán)格實(shí)施正確的微生物標(biāo)本送檢和檢驗(yàn)方法,是做好醫(yī)院感染病原體監(jiān)測(cè)的關(guān)鍵。鑒此,希望臨床各科能按照本操作規(guī)范采樣送檢。

一、醫(yī)院感染標(biāo)本的采集和運(yùn)送基本原則

1.發(fā)現(xiàn)醫(yī)院感染應(yīng)及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查,我院總的醫(yī)院微生物標(biāo)本送檢率應(yīng)不低于70%。

2.盡量在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本。

3.標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作,減少或避免機(jī)體正常菌群及其他雜菌污染。

4.標(biāo)本采集后立即送至實(shí)驗(yàn)室,床旁接種可提高病原菌檢出率。

5.以棉拭子采集的標(biāo)本如咽拭子、肛拭子或傷口拭子,應(yīng)立即送檢。

6.盛標(biāo)本容器須經(jīng)滅菌處理,但不得使用消毒劑。

7.送檢標(biāo)本應(yīng)注明來(lái)源和檢驗(yàn)?zāi)康?使實(shí)驗(yàn)室能正確選用相應(yīng)的培養(yǎng)基和適宜的培養(yǎng)環(huán)境,必要時(shí)應(yīng)注明選用何種抗菌藥物。

二、常見(jiàn)醫(yī)院感染標(biāo)本送檢方法

1.血液與骨髓

①通常采血部位為肘靜脈。疑似細(xì)菌性心內(nèi)膜炎時(shí),以肘動(dòng)脈或股動(dòng)脈采血為宜。切忌在靜脈點(diǎn)滴抗菌藥物的靜脈處采取血標(biāo)本。

②采血部位的局部皮膚應(yīng)嚴(yán)格消毒。將采集的血液注入血培養(yǎng)基前,應(yīng)更換針頭或過(guò)火消毒針頭。血培養(yǎng)瓶應(yīng)在避光室溫中保存,不必置冰箱保存。

③每次采血量成人5一10ml,嬰幼兒l一5ml,培養(yǎng)基與血液之比以lO:1為宜,以稀釋血液中的抗菌藥物、抗體等殺菌物質(zhì)。

④懷疑菌血癥應(yīng)盡早采血,體溫上升階段采血可提高陽(yáng)性率,但要防止因等待而延誤時(shí)機(jī)。對(duì)已用抗菌藥物而又不能停藥者,可在下次用藥前采血。

⑤每例病人至少采血兩次,間隔0.5一lh,以利于提高陽(yáng)性率和區(qū)分感染菌與皮膚污染菌。

⑥對(duì)疑為細(xì)菌性骨髓炎或傷寒病人,在病灶部位或髂前(后)上棘處嚴(yán)格消毒后抽取骨髓lml作增菌培養(yǎng)。

2.尿液

①中段尿:女性采樣前應(yīng)先用肥皂水或0.1%高錳酸鉀溶液沖洗外陰部及尿道口;男性須翻轉(zhuǎn)包皮沖洗,用O.1%新潔爾滅消毒尿道口.滅菌紗布擦干后收集標(biāo)本。

②導(dǎo)尿管導(dǎo)尿采樣可減少污染。對(duì)留置導(dǎo)尿者,可用碘酒消毒尿道口處的導(dǎo)尿管壁,用空針細(xì)針頭斜穿管壁抽吸尿液。或消毒后解開(kāi)接口,棄去導(dǎo)尿管前段尿液、留無(wú)污染的膀胱內(nèi)尿液數(shù)毫升送檢。不可從集尿袋的下端管口留取標(biāo)本。

③尿厭氧菌培養(yǎng),或嬰幼兒中段尿采集困難,或培養(yǎng)結(jié)果與病情不符時(shí),可經(jīng)恥骨上皮膚穿刺采集無(wú)污染的膀胱內(nèi)尿液。

④送檢標(biāo)本以早晨第一次尿液為佳。

⑤室溫下尿標(biāo)本耽擱稍久,可致尿內(nèi)細(xì)菌濃度明顯增加而影響病原菌與污染菌的區(qū)分。不能立即送檢者,可暫存4℃冰箱。

3.痰液

①咳痰:清水反復(fù)漱口后用力咳嗽,從呼吸道深部咳出新鮮痰液于無(wú)菌容器送檢。痰量極少者可用45℃的lO%氯化鈉溶液霧化吸入導(dǎo)痰。

②對(duì)咳嗽乏力或昏迷病人,可用吸痰管經(jīng)鼻腔或口腔抵達(dá)氣管腔內(nèi)吸引痰液。用纖維支氣管鏡可直接在病灶部位采集高濃度的感染病原菌,但不能完全避免咽喉部正常菌群污染。

③雙側(cè)肺部感染伴人工氣道如氣管切開(kāi)或氣管插管患者,可用吸痰管經(jīng)人工氣道插至肺支氣管水平吸引痰液。

④對(duì)重癥、難治、或伴免疫抑制、或疑似厭氧菌引起的醫(yī)院內(nèi)肺部感染,可采用環(huán)甲膜穿刺經(jīng)氣管吸引(TTA)、經(jīng)胸壁穿刺肺吸引(LA)、經(jīng)纖維支氣管鏡或人工氣道作防污染雙套管毛刷(PSB)或防污染支氣管肺泡灌洗(PBAL)采集無(wú)口咽部菌群污染的痰液,進(jìn)行感染病原學(xué)診斷。

⑤痰標(biāo)本不能及時(shí)送檢者,可暫存4℃冰箱。如果室溫下延擱數(shù)小時(shí),定植于口咽部的非致病菌可呈過(guò)度生長(zhǎng),而肺炎球菌、葡萄球菌和流感桿菌檢出率則明顯下降。

4.傷口、燒傷創(chuàng)面與膿液

①用無(wú)菌生理鹽水擦洗病灶表面后,用棉拭于取病灶深部的膿液和分泌物,置運(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi)送檢。

②對(duì)未漬破的膿腫宜用碘酒、酒精消毒皮膚后,以無(wú)菌注射器抽取膿液送檢:也可于切開(kāi)排膿時(shí)用無(wú)菌棉拭子采樣。

5.糞便

①排便后,挑取有膿血、粘液部分的糞便約2—3g(液狀糞便則取絮狀物),盛于滅菌廣口瓶或蠟紙盒送檢。用棉拭子挑取糞便插入Cnry—BLair運(yùn)送培養(yǎng)基或PH7.0的磷酸鹽甘油中送檢,可提高病原菌檢出率.

②對(duì)不易獲取糞便者或嬰幼兒,可用直腸拭于(又稱肛拭)采集。將拭子前端用無(wú)菌甘油水濕潤(rùn),然后插入肛門(mén)約4—5cm(幼兒約2—3cm)處,輕輕旋轉(zhuǎn)擦取直腸表面粘液后退出置運(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi)送檢。

6.咽拭、口腔拭子

①病人清水嗽口后.由檢查者將其舌外拉使懸雍垂盡可能向外牽引,棉拭子越過(guò)舌根到咽后壁或懸雍垂的后側(cè),反復(fù)擦拭數(shù)次,插入運(yùn)送培養(yǎng)基。棉拭子應(yīng)避免觸及舌、口腔粘膜和唾液。

②對(duì)化膿性扁桃體炎或口腔念珠菌病,用棉拭子在病灶部位擦拭數(shù)次即可。

7.漿膜腔積液、腦脊液

①漿膜腔積液包括胸水、腹水如心包液、關(guān)節(jié)液和鞘膜液等.以嚴(yán)格無(wú)菌操作抽取數(shù)毫升液體置無(wú)菌試管或小瓶送檢。對(duì)易自凝的標(biāo)本可添加抗凝劑。

②嚴(yán)格無(wú)菌操作下采取腦脊液數(shù)毫升置于無(wú)菌試管。標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,以防細(xì)菌死亡。疑似有腦膜炎奈瑟菌時(shí),應(yīng)注意保暖,不可置冰箱保存。

8.生殖道標(biāo)本

①根據(jù)不同感染種類和病變特征采集不同的標(biāo)本。采集尿道標(biāo)本時(shí),應(yīng)先用生理鹽水局部清洗,以無(wú)菌棉拭子插入尿道口l一2cm停留十余秒鐘。輕輕旋轉(zhuǎn)拭子后退出.

②對(duì)外陰部糜爛、潰瘍者,經(jīng)生理鹽水清洗后用棉拭子擦取病灶邊緣的分泌物。

③陰道和官頸口分泌物須在窺陰器下用長(zhǎng)棉拭子采集。

④子宮內(nèi)分泌物需用無(wú)菌導(dǎo)管抽取.導(dǎo)管外套一層保護(hù)膜,插入子宮后再刺穿該膜予負(fù)壓吸引,可減少陰道菌群污染。

⑤女性盆腔膿腫,應(yīng)在陰道局部消毒后,由直腸子宮凹陷處進(jìn)針抽取。

⑥前列腺液需進(jìn)行前列腺按摩獲取。

9.組織標(biāo)本

①表淺的感染組織和各種竇道標(biāo)本可用棉簽擦拭、小刀刮取、穿刺抽吸或手術(shù)切除。對(duì)竇道和痰管應(yīng)深部刮取管壁組織。

②深部組織標(biāo)本可經(jīng)皮膚穿刺采集或手術(shù)切取。標(biāo)本置無(wú)菌容器并加少量生理鹽水以保濕度,或置肉湯增菌液,或置血平皿送檢。

③尸檢標(biāo)本應(yīng)于死后20h內(nèi)采取,以防腸道等菌群侵入引起污染。

④作病原體分離的組織標(biāo)本,不可用福爾馬林固定。疑有污染的較大組織塊,可用燒紅的烙鐵燒灼其表面或置沸水中5—10秒鐘使表面變白消除污染后,再用無(wú)菌器械切開(kāi)組織,取中央部位組織送檢。

10.靜脈導(dǎo)管

從病人體內(nèi)拔出靜脈插管,用無(wú)菌技術(shù)剪去導(dǎo)管體外部分。體內(nèi)段導(dǎo)管立即置血平皿上作滾動(dòng)涂布接種。不能作床旁接種者,將導(dǎo)管置含有少量生理鹽水的無(wú)菌試管內(nèi)送檢。也可將剪下的導(dǎo)管體內(nèi)段置肉湯增菌液或置于血培養(yǎng)液內(nèi),但不能區(qū)分導(dǎo)管感染菌與少量的定植菌。